激光共聚焦显微镜样品制备方法步骤如下：

1、样品准备：选择合适的细胞或组织样品，可以使用活体细胞、培养细胞、切片等多种样品。样品应该具备较好的生物活性和显微结构。

2、样品固定：为了保持样品的形态和结构，需要进行样品的固定处理。根据不同的样品类型和研究目的，可以选择适合的固定方法，如甲醛、乙醇、冰醋酸、戊醛等。

3、渗透处理：有些样品在固定后会出现浸泡不透的情况，需要进行渗透处理，以保证样品充分浸透。

4、切片制备：对于需要进行观察的样品，需要进行切片制备。切片厚度应该根据研究目的和样品类型来确定，一般在2-5微米之间。

5、荧光标记：对于需要进行荧光标记的样品，可以采用免疫荧光标记技术进行标记。根据研究目的和样品类型，选择适合的抗体和荧光染料进行标记。

6、封片和保存：将制备好的样品进行封片处理，以防止荧光染料挥发和样品污染。封片后将样品保存于4℃或-20℃冰箱中备用。

7、激光共聚焦显微镜观察：将制备好的样品置于激光共聚焦显微镜中，进行观察和拍照。观察时可以选择不同的激发波长和发射波长，以获取Z佳的荧光信号。

以上是激光共聚焦显微镜样品制备的一般步骤，具体操作可根据研究目的和实验要求进行调整。