激光共聚焦显微镜的重要参数介绍

激光共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope, LSCM）是一种高分辨率、高灵敏度的显微镜，广泛应用于生物医学研究、材料科学等领域。其重要参数包括但不限于以下几个方面：

一、光学系统

数值孔径（NA）：

数值孔径是物镜和聚光镜的重要参数，直接影响分辨率和成像质量。高数值孔径的物镜能够收集更多的光线，提高分辨率。

光学校正：

激光共聚焦显微镜常采用无限远校正光学系统，确保成像质量。物镜齐焦距离需符合国际标准，如≤45mm。

透射光照明：

使用超长寿命LED作为透射光光源，具有光强管理功能，能在切换不同物镜时保持光强不变。

二、激光器与荧光光源

激光器类型与功率：

激光器是激光共聚焦显微镜的核心部件，常用波长包括405nm、488nm、561nm、638nm等。激光器功率需适中，以避免光毒性和样品损伤，同时保证足够的荧光激发效率。

例如，固态激光器405nm的功率可能≤30mW，488nm、561nm等波长的激光器也有相应的功率限制。

荧光光源：

配备电动控制光闸和电动光亮度调节功能的荧光光源，至少120W，寿命可达2000小时以上，保证均匀的荧光照明。

三、扫描模块

扫描器与显微镜一体化设计：

扫描器与显微镜的一体化设计减少了光路损失，提高了成像质量。

扫描模式：

支持多种扫描模式，包括点扫描、线扫描、区域扫描、光谱波长扫描等。能够实现X、Y、Z、T、λ（光谱波长）、I（光强度）、A（区域）等多维组合扫描。

扫描速度与分辨率：

高分辨率扫描模式下，XY轴分辨率可达≤120nm，XZ轴分辨率可达≤200nm。扫描速度可根据需要调节，如512×512分辨率下可达≥10帧/秒，512×16分辨率下可达≥131帧/秒。

四、检测器与物镜

检测器类型与数量：

配备多个荧光检测器（≥3个）和透射光检测器（≥1个），荧光检测器全部为光谱型检测器，检测范围调节精度≤1nm。

物镜系列：

提供多种倍数的物镜，如5X、10X、20X、40X、63X、100X等，满足不同观测需求。高NA值、高透光率的大孔径物镜能够显著提高成像质量。

五、软件与工作站

软件功能：

软件需具备智能化光路设置、自动预扫描、自动聚焦、多维获取图像、Z轴深度补偿、交互式漂白等功能。

支持样品发射荧光扫描涵盖410～850nm光谱扫描，具备高分辨多色同时成像能力。

工作站配置：

工作站需具备高性能的硬件配置，如多核主频不低于3.0GHz的处理器、64GB内存、16GGDDR6显存等，以确保流畅的图像处理和数据分析。

六、其他参数

电动控制部件：

显微镜配有大屏幕彩色触摸屏可记忆控制操作，可电动控制光源、物镜转盘、XYZ调焦、荧光激发块、聚光镜等部件。

防震台与温控系统：

配备系统专用防震台，确保成像稳定性。可选配活细胞培养系统，实现温度、CO2浓度及湿度的精确控制。

综上所述，激光共聚焦显微镜的重要参数涉及光学系统、激光器与荧光光源、扫描模块、检测器与物镜、软件与工作站等多个方面。这些参数的优化与合理配置对于提高成像质量、满足科研需求具有重要意义。